質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的濃度一般是多少?
一般來(lái)說(shuō)10~100ng都可以,不過(guò)其實(shí)我們真正做的時(shí)候就是不管濃度多大(濃度約在100ng/ul以上),都是取1ul的質(zhì)粒溶液,稀釋10倍,就是10ul,加入到100ul的感受態(tài)細(xì)胞里~每次都這樣做,沒有問題。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的原理
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化是一種常用的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),利用細(xì)菌細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中。這項(xiàng)技術(shù)經(jīng)常用于基因工程和分子生物學(xué)的研究。
質(zhì)粒被定義為能夠自主復(fù)制和轉(zhuǎn)移的DNA小分子。大多數(shù)質(zhì)粒存在于細(xì)菌中,它們是一種先天的基因轉(zhuǎn)移機(jī)制。質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的原理是利用細(xì)菌的天然質(zhì)粒轉(zhuǎn)移過(guò)程,將外源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞,并在宿主細(xì)胞中表達(dá)。