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新興技術(shù)!哈佛教授研發(fā)冷凍生物打印
2022-02-07 10:20:20 來(lái)源: DeepTech深科技 編輯:

生物 3D 打印作為一項(xiàng)新興技術(shù),越來(lái)越受到生物技術(shù)專家等的青睞。其打印機(jī)理通常是是通過(guò)逐層堆積的方式來(lái)構(gòu)建復(fù)雜的實(shí)體生物組織。該技術(shù)因設(shè)計(jì)靈活、個(gè)性化定制等優(yōu)勢(shì)而廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中,具有十分廣闊的應(yīng)用前景。

提到生物打印,和日常打印類似,也需要打印“墨水”,但是這里的墨水來(lái)源于活性細(xì)胞和生物材料。我們知道,細(xì)胞的生存需要一定的微環(huán)境,因此,這里存放的“生物墨水”就需要設(shè)計(jì)出便于生物打印和儲(chǔ)存期間有效保存細(xì)胞的組件。

而隨著新材料和微納米技術(shù)的發(fā)展,這種組件的設(shè)計(jì)擁有了更加靈活和多樣的性能,以至于細(xì)胞在更加極端惡例的環(huán)境下依然能夠生存,其中最引人注目的技術(shù)之一就是低溫生物打印技術(shù)。

哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院 Y. Shrike Zhang(張宇)教授專注于創(chuàng)新生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù),包括生物 3D 打印、器官芯片、微流控、生物分析等,以重建功能化組織及其仿生模型。其課題組在 Science、Nat Rev Mater、Nat Commun、PNAS、Matter、Adv Mater 等期刊上發(fā)表論文 260 余篇。

近日,Y. Shrike Zhang 教授團(tuán)隊(duì)在 Matter 報(bào)道了一種非常規(guī)的生物打印技術(shù),稱為冷凍生物打印,利用生物打印和低溫保存方法協(xié)同,通過(guò)使用新型打印裝置和生物墨水,打印的生物組織可以被儲(chǔ)存較長(zhǎng)時(shí)間,并在需要時(shí)進(jìn)行解凍/交聯(lián)以及復(fù)蘇后的培養(yǎng)和使用。該技術(shù)的研發(fā)有望擴(kuò)展生物打印的應(yīng)用,如可儲(chǔ)存的生物組織和組織模型,以便可以隨時(shí)運(yùn)送到所需的地點(diǎn)。該研究成果以“Freeform cell-laden cryobioprinting for shelf-ready tissue fabrication and storage”為題。

圖 | 相關(guān)論文(來(lái)源:Matter)

生物在 3D 打印的組織結(jié)構(gòu)的制作和存儲(chǔ)方面存在挑戰(zhàn)。 一方面,大多數(shù)生物打印技術(shù),如廣泛使用的擠出式生物打印,它們的缺點(diǎn)是較為復(fù)雜的打印過(guò)程,因此該制造技術(shù)在許多環(huán)境下難以實(shí)現(xiàn)。 另一方面,由于缺乏長(zhǎng)期儲(chǔ)存細(xì)胞的功能性設(shè)計(jì),所以預(yù)先打印的生物組織產(chǎn)品無(wú)法實(shí)現(xiàn)較高的現(xiàn)貨率。

結(jié)合先進(jìn)生物制造技術(shù)和儲(chǔ)存方法(如生物打印和低溫保存)是解決上述障礙的一個(gè)潛在的解決方案。由此,生物打印的組織可以提前在非現(xiàn)場(chǎng)制備,允許在低溫條件下直接存儲(chǔ),以供以后的實(shí)驗(yàn)室或臨床使用。但是這種方法存在一個(gè)挑戰(zhàn),那就是要解決冰晶的形成和再結(jié)晶等可能會(huì)對(duì)所制備組織的細(xì)胞活性產(chǎn)生負(fù)面影響。

為了解決這個(gè)挑戰(zhàn),生物墨水的設(shè)計(jì)十分重要,以便在生物打印和冷凍儲(chǔ)存/復(fù)蘇期間有效保存細(xì)胞。研究表明,冷凍保護(hù)劑(CPA)在消除或減少冰晶形成中有關(guān)鍵作用。在沒(méi)有 CPA 的情況下,冰晶會(huì)大量快速生長(zhǎng),從而破壞細(xì)胞膜而危害細(xì)胞的生存能力。

二甲基亞砜(DMSO)是一種傳統(tǒng)的 CPA,廣泛用于低溫保存,以減少冰晶的形成。此外,分子量較大的 CPA 可以保護(hù)細(xì)胞免受細(xì)胞外高滲造成的滲透損傷。如各種二糖如蔗糖、海藻糖、乳糖、和麥芽糖,以及三糖如麥芽糖和棉子糖等,都顯示出良好的低溫保護(hù)作用。

此外,軟材料,特別是文中所用的水凝膠材料,其構(gòu)成的 3D 網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)可以進(jìn)一步減少冰晶的形成,從而為細(xì)胞提供一個(gè)固有的物理低溫保護(hù)微環(huán)境,即含有 CPA 的細(xì)胞負(fù)載水凝膠支架提供了良好的低溫保存環(huán)境,從而在復(fù)活后具有較高的細(xì)胞活力和細(xì)胞功能。

文中強(qiáng)調(diào)的設(shè)計(jì),是一種同時(shí)進(jìn)行生物 3D 打印和低溫保存細(xì)胞承載組織構(gòu)建的方法。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是通過(guò)設(shè)計(jì)一個(gè)冷凍板,其在打印過(guò)程中可以允許精確的溫度控制,從而在低溫可控條件利用含有 CPA 和活細(xì)胞的生物墨水打印生物組織。具體如下圖,該裝置里,載細(xì)胞生物墨水在嚴(yán)格控制溫度的冷凍板上進(jìn)行低溫生物打印,并在低溫條件下長(zhǎng)期保存。在隨后的培養(yǎng)之前,低溫生物打印的結(jié)構(gòu)可以運(yùn)輸至需要的地點(diǎn)進(jìn)行復(fù)蘇和交聯(lián),以及隨后的使用。

隨后,為了進(jìn)一步驗(yàn)證這項(xiàng)技術(shù),該團(tuán)隊(duì)利用間充質(zhì)干細(xì)胞成骨、成脂和成軟骨分化后細(xì)胞的功能性來(lái)考察打印后生物組織的存活、增殖和分化能力。有趣的是,該設(shè)計(jì)證明了冷凍生物打印的細(xì)胞載體可以有效保證細(xì)胞的存活率和功能性。除此之外,該研究也核實(shí)了低溫生物打印的組織能夠維持其誘導(dǎo)血管生成的能力,從而說(shuō)明了此類設(shè)計(jì)沒(méi)有對(duì)細(xì)胞或者生長(zhǎng)因子造成損害。

該研究重要的亮點(diǎn)就是設(shè)計(jì)了一個(gè)用于構(gòu)建低溫條件的冷凍板,這是保證細(xì)胞活性微環(huán)境的關(guān)鍵組件,同時(shí),該裝備也會(huì)保存細(xì)胞、保證生物打印組織的功能和表面細(xì)胞的生存提供了有效性,為骨組織工程或者細(xì)胞組織模型打開(kāi)了一個(gè)嶄新的創(chuàng)新之路。

基于該研究,人們可以想象,細(xì)胞在此微環(huán)境下能夠生存并且可以通過(guò)該設(shè)計(jì)打印特定的生物組織和器官,并保證了組織細(xì)胞的增殖和分化能力,這種創(chuàng)新設(shè)計(jì)可對(duì)于任何醫(yī)院,任何一個(gè)病人來(lái)說(shuō),都可以說(shuō)是福音,因?yàn)樗梢詾榛颊吡可矶ㄖ埔粋€(gè)具有活性細(xì)胞載體的組織和器官,并且可以提前制備和儲(chǔ)存以備不時(shí)之需,對(duì)于提高患者的生存和組織修復(fù)等都是莫大的幫助;當(dāng)然,對(duì)于體外組織模型的可轉(zhuǎn)運(yùn)性和現(xiàn)貨率亦有很大的提高。

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關(guān)鍵詞: 生物 打印 冷凍 新興技術(shù)

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